宽场显微通过在整个视野范围内均匀照明样品，使所有焦内与焦外的荧光信号同时被相机接收，是最常见的荧光成像方式。该方式常用于细胞培养观察、组织切片荧光标记成像以及高通量筛查实验。
由于所有光信号同时进入成像，厚样本中容易产生离焦和背景干扰，降低成像清晰度。因此宽场显微成像通常需要相机具备高灵敏度和低噪声，以捕捉微弱荧光信号；同时具备较大靶面和高动态范围，以保证在高通量和强弱信号共存条件下仍能获得清晰稳定的图像。